細胞培養實(shí)驗室幾大區域該如何設計
細胞培養是一種無(wú)菌操作技術(shù),需要保護工作環(huán)境和條件免受微生物污染和其他不良因素的影響。其實(shí)驗室設計的原理是防止微生物污染和不良因素,需要潔凈的工作環(huán)境,新鮮空氣,干燥和無(wú)煙無(wú)塵。細胞培養室的設計原理一般是無(wú)菌操作區設計在室內活動(dòng)較少的內側,常規操作和封閉培養在一個(gè)房間,進(jìn)行洗滌和消毒在另一個(gè)房間里。
1.無(wú)菌操作區
(1)無(wú)菌操作區:無(wú)菌操作區只限于細胞培養及其他無(wú)菌操作的區域,最好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。
理想的無(wú)菌操作室應劃為三部分:
a) 更衣室—―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 緩沖間—―位于更衣間與操作間之間,目的是為了保證操作間的無(wú)菌環(huán)境,同時(shí)可放置恒溫培養箱及某些必需的小型儀器。
c) 無(wú)菌操作間—―專(zhuān)用于無(wú)菌操作、細胞培養。其大小要適當,且其頂部不宜過(guò)高(不超過(guò)2.5m)以保證紫外線(xiàn)的有效滅菌效果;墻壁光滑無(wú)死角以便清潔和消毒。工作臺安置不應靠墻壁,臺面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀(guān)察。
(2)凈化工作臺:操作簡(jiǎn)單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養室使用的凈化工作臺主要有兩種:a)側流式或稱(chēng)垂直式 b)外流式或稱(chēng)水平層流式。
2.孵育區
本區對無(wú)菌的要求雖不比無(wú)菌區嚴格,但仍需清潔無(wú)塵,因此也應設置在干擾少而非來(lái)往穿行的區域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行,后者費用高,一般實(shí)驗室多采用孵箱進(jìn)行工作。
3.制備區
在該區主要進(jìn)行培養液及有關(guān)培養用的液體等的制備。
4.儲藏區
主要存放各類(lèi)冰箱、干燥箱、液氮罐、無(wú)菌培養液、培養瓶等,此環(huán)境也需要清潔無(wú)塵。
5.清洗和消毒滅菌區
清潔和消毒滅菌區應與其他區域分開(kāi),主要進(jìn)行所有細胞培養器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。
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