上一篇文章《細胞培養實(shí)驗室應該怎么樣做區域規劃》講到了細胞培養實(shí)驗室的區域規劃，有了區域規劃，在規劃設計的時(shí)候，我們還得考慮會(huì )用到哪些設備。下面小編就從常用設備和特殊設備兩方面來(lái)分析。

組織細胞培養室除一般實(shí)驗室的普通常規設備外，尚有一些特殊需要的設備?；究煞譃閮纱箢?lèi)：第一類(lèi)為常用的基本設備；第二類(lèi)為較高級的特殊設備。

1、常用的基本設備

（1） 儀器：

a）顯微鏡：倒置顯微鏡——是組織細胞培養室所必需的日常工作常規使用設備之一，便于掌握細胞的生長(cháng)情況并觀(guān)察有無(wú)污染等。

若有條件，尚可配置帶有照相系統的高質(zhì)量相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統或縮時(shí)電影拍攝裝置等，以便隨時(shí)觀(guān)察、記錄、攝影細胞生長(cháng)情況。

a） 培養箱：體外培養的細胞和體內細胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，大多數情況下，最適溫度是37℃，溫差變化一般不應超過(guò)±0.5℃，細胞在溫度升高2℃時(shí)，持續數小時(shí)即不能耐受，40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的培養箱，如具有較高靈敏度的恒溫培養箱及CO2培養箱。

恒溫培養箱——應選隔水式或晶體管自控溫培養箱，此類(lèi)培養箱靈敏度高，溫度控制較穩定。一般的恒溫培養箱價(jià)格較便宜，其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養。

CO2培養箱——目前多數的細胞培養室已廣泛使用。CO2培養箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細胞培養時(shí)所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于使培養液的pH保持穩定，適用于開(kāi)放或半開(kāi)放培養。培養細胞的器皿可用培養皿、培養板或培養瓶；當使用培養瓶時(shí)，可將瓶蓋略微旋松，使培養瓶?jì)扰c外界保持通氣狀態(tài)。由于這種培養方法培養器皿內部與外界相通，培養箱內空氣必須保持清潔，應定期以紫外線(xiàn)照射或酒精消毒。同時(shí)培養箱應放置盛有無(wú)菌蒸餾水的水槽，防止培養液蒸發(fā)，使箱內相對濕度始終保持為100％。

c）干燥箱：用于細胞培養箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí)，電熱干燥箱升溫較高，一般需達到160℃以上。通常使用鼓風(fēng)式電熱干燥箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始，至100℃時(shí)，停止鼓風(fēng)，應避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細胞的生長(cháng)。消毒后，不能立即打開(kāi)箱門(mén)以免驟冷而導致玻璃器皿損壞，應等候溫度自然下降至100℃以下方可開(kāi)門(mén)。

d）水純化裝置：細胞培養對水的質(zhì)量要求較高，細胞培養以及與細胞培養工作相關(guān)的液體的配制用水必須事先嚴格純化處理。水純化時(shí)可采用離子交換裝置或蒸餾器。離子交換純水尚不能有效去除有機物，因此用水時(shí)尚需再次蒸餾。進(jìn)行細胞培養時(shí)配制各種培養液及試劑等均需使用三次蒸餾水：即使是用于玻璃器皿的沖洗，也應使用二次以上蒸餾水。

目前國內使用較多的是自動(dòng)雙重純水蒸餾器（石英管加熱），使用方便，安全、蒸餾速度快（1600ml/h）。

使用注意：

(a)不可采用普通自來(lái)水蒸餾，以免蒸餾器內很快結成水垢影響蒸餾效果；同時(shí)，還需視蒸餾器內存水垢程度定期徹底清洗蒸餾器。

(b)正確的使用方法是將經(jīng)金屬蒸餾器蒸餾的蒸餾水加入玻璃蒸餾器內進(jìn)行再次蒸餾。

一般配制培養液的用水應在配液前蒸餾，不宜使用存放數日的三蒸水，以免影響培養用水的質(zhì)量。

目前市場(chǎng)上供應的是含有各種級別和類(lèi)型的采用一種或多種純化方法相結合的使普通水純化為純水和超純水的純水系統可供選擇。例如：設計靈活的可以?huà)毂?、也可為臺式，也可以有儲水箱、也可直接用分液槍的純水裝置；還可根據各類(lèi)實(shí)驗用水需求選擇配備有效殺菌或去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，甚至可有效去除掉熱源、內毒素的超濾型純水器。

e）冰箱：細胞培養室必須配備

(a)普通冰箱或冷藏柜

——儲存培養液、生理鹽水、Hank’s液試劑等培養用的物品及短期保存組織標本。

(b)低溫冰箱（-20℃）、超低溫冰箱

——用于儲存需要冷凍保存生物活性及較長(cháng)時(shí)期存放的制劑，如酶、血清等。

——細胞培養室的冰箱應屬專(zhuān)用，不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質(zhì)，且應保持清潔。

f）細胞冷凍儲存器：儲存器常用的是液氮容器。根據使用需要分為不同的類(lèi)型及多種規格。選擇購置液氮容器時(shí)要綜合考慮容積大小，取放使用方便及液氮揮發(fā)量（經(jīng)濟）三種因素。液氮容器的大小可自25L～500L，可以?xún)Υ?ml的安瓿250～15000個(gè)左右。液氮溫度可低達-196℃，使用時(shí)應防止凍傷。由于液氮不斷揮發(fā)，應注意觀(guān)察存留液氮情況，及時(shí)定期補充液氮，避免揮發(fā)過(guò)多而致細胞受損。

目前，國內各類(lèi)實(shí)驗室已廣泛使用新型的細胞冷凍儲存器。市場(chǎng)所提供的各種新型的細胞冷凍儲存器具有性能優(yōu)異，使用方便等特點(diǎn)。例如：

——可通過(guò)先進(jìn)的電子控制器實(shí)現凍存自動(dòng)化并監測液氮水平和樣品溫度，確保樣品溫度始終處于設定溫度點(diǎn)；

——可配備先進(jìn)的報警系統，分別警報液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況：

——同時(shí)具備熱氣體旁路系統，防止高于-130℃的暖空氣進(jìn)入液氮罐，從而更有效地保護樣品，防止升溫。

另外，多種規格的先進(jìn)液氮運輸，供應罐系列不僅移動(dòng)方便，還可通過(guò)連接管給儲存罐補充液氮，提高工作效率，保證樣品安全。

g）離心機：進(jìn)行細胞培養時(shí)，常規需要進(jìn)行制備細胞懸液、調整細胞密度、洗滌、收集細胞等工作，通常需要使用離心機。

(a)一般可常規配置4000rpm的國產(chǎn)臺式離心機，例如細胞沉降，使用80～100g的離心機即可，離心力過(guò)大有時(shí)可能引起細胞的損傷。

(b)另外，可根據需要添置其他類(lèi)型如大容量或可調節溫度的離心機等

(c)若需特殊用途，例如某些細胞的分離制備需梯度離心，則需另行配置實(shí)驗所需的具備其他特殊功能的離心機。

h）天平：常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平。

分析天平的感量為0.1mg、0.01mg和0.001mg。根據稱(chēng)取物質(zhì)的量和稱(chēng)量精度的要求，選擇適宜級別的天平。要求精密稱(chēng)定時(shí)，當取樣量大于100 mg 選用感量為0.1mg天平，在100－10 mg 選用感量為0.01mg 天平，小于10mg選用感量為0.001 mg天平 。

i）消毒器：直接或間接與細胞接觸的物品均需消毒滅菌處理。常用如下：

(a)手提式高壓蒸汽消毒器;

(b)目前市場(chǎng)上，具有高效、安全、方便等性能，適用于各種器皿、液體、培養基的高壓滅菌裝置已在流通（如脈動(dòng)真空滅菌器）?？晒┦褂谜咴跍缇耐瑫r(shí)監測滅菌容器內的壓力和溫度，確保滅菌質(zhì)量和安全，并可通過(guò)記憶（儲存）支持系統改變各種參數（例如滅菌、排氣、加熱等參數），即使在進(jìn)行滅菌時(shí)發(fā)生停電故障，仍可保留所設定的參數

j）濾器：目前細胞培養工作中采用的培養用液，包括人工合成培養液、血清、消化用胰酶等常含有維生素、蛋白、多肽、生長(cháng)因子等物質(zhì)，這些物質(zhì)在高溫或射線(xiàn)照射下易發(fā)生變性或失去功能，因而上述液體多采用濾過(guò)消毒以除去細菌。

目前常使用的濾器有Zeiss濾器、玻璃濾器和微孔濾器，各種濾器有其使用原理和特點(diǎn)（后詳述）。

（2）培養用器皿：

a）培養器皿：供細胞接種、生長(cháng)等用的器皿，可由透明度好、無(wú)毒的中性硬質(zhì)玻璃或無(wú)毒而透明光滑的特制塑料制成。

（a）玻璃培養器皿的優(yōu)點(diǎn)是多數細胞均可生長(cháng)，易于清洗、消毒，可反復使用，并且透明而便于觀(guān)察；缺點(diǎn)是易碎，清洗時(shí)費人力。

（b）塑料制培養器皿的優(yōu)點(diǎn)是一次性使用，廠(chǎng)家已消毒滅菌密封包裝，打開(kāi)即可用于細胞培養操作。

常用的培養器皿：

培養瓶：由玻璃或塑料制成。主要用于培養、繁殖細胞。進(jìn)行培養時(shí)培養瓶瓶口加蓋螺旋瓶蓋或膠塞，膠塞多用于密封培養。國產(chǎn)培養瓶的規格以容量（ml）表示，如250ml、100ml、25ml等；進(jìn)口培養瓶則多以底面積（cm2）表示。

培養皿：由玻璃或塑料制成，供盛取、分離、處理組織或做細胞毒性、集落形成、單細胞分離、同位素摻入、細胞繁殖等實(shí)驗使用。常用的培養皿規格有10cm、9cm、6cm、3.5cm等。

多孔培養板：為塑料制品?？晒┘毎寺〖凹毎拘缘雀鞣N檢測實(shí)驗使用。其優(yōu)點(diǎn)是節約樣本及試劑，可同時(shí)測試大量樣本，易于進(jìn)行無(wú)菌操作。培養板分為各種規格，常用的規格有：96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。

各種單層生長(cháng)的細胞在培養器皿中長(cháng)滿(mǎn)時(shí)可獲得的細胞數，主要是取決于器皿的底表面積和細胞體積的大小。常用培養器皿及可獲得的細胞數（以Hela細胞為例）見(jiàn)表2。

b）培養操作有關(guān)的器皿：

(a)貯液瓶：主要用于存放或配制各種培養用液體如培養液、血清及試劑等。貯液瓶分為各種不同規格，如1000ml、500ml、250ml、100ml、50ml、5ml等。

(b)吸管：主要分為刻度吸管、無(wú)刻度吸管?？潭任苤饕糜谖?、轉移液體，常用的有1ml、2ml、5ml、10ml等規格。無(wú)刻度吸管分為直頭吸管及彎頭吸管，除可以作吸取、轉移液體外，彎頭尖吸管還常用于吹打、混勻及傳代細胞。

(c)加樣器（移液器）：用于吸取、移動(dòng)液體或滴加樣本?？筛鶕枰{節量的大小，吸量準確、方便。尤以微量加樣器，可保證實(shí)驗樣品（或試劑）含量精確，重復性良好。目前，可高溫消毒的，多通道的各類(lèi)移液器可供使用者選擇，能確保加樣準確、快速、方便并且達到無(wú)菌要求。

c）其他用品：尚有收集細胞用的離心管，放置試劑或臨時(shí)插置吸管用的試管，裝放吸管以便消毒的玻璃或不銹鋼容器，用于存放小件培養物品便于高壓消毒的鋁制飯盒或貯槽，套于吸管頂部的橡膠吸頭，封閉各種瓶、管的膠塞、蓋子、凍存細胞用的安瓿或凍存管、不同規格的注射器、燒杯和量筒以及漏斗，超凈工作臺使用的酒精燈，供實(shí)驗人員操作前清潔消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型噴壺等。

（3）器械：主要用于解剖、取材、剪切組織及操作時(shí)持取物件。常用的有：手術(shù)刀或解剖刀、手術(shù)剪或解剖剪（彎剪及直剪），用于解剖動(dòng)物、分離及切剪組織，制備原代培養的材料；眼科虹膜小剪（彎剪或直剪），用于將組織材料剪成小塊；血管鉗及組織鑷、眼科鑷（彎、直），用于持取無(wú)菌物品（如小蓋玻片）夾持組織等；口腔科探針或代用品，用以放置原代培養之組織小塊。

2、特殊設備

細胞培養實(shí)驗室除了應配備上述的常用基本設備以外，如有條件，可添置一些特殊或先進(jìn)的設備儀器，以便更有效、更精確、更深入地進(jìn)行實(shí)驗室工作。例如：

（1）酶聯(lián)免疫檢測儀——可用于進(jìn)行免疫學(xué)測定及細胞毒性、藥物敏感性檢測等。

（2） 超低溫冰箱（-85℃）——便于儲存某些試劑及標本。

（3）旋轉培養器——用于某些特殊細胞或需要收獲大量細胞的培養。

（4）熒光顯微鏡——進(jìn)行熒光染色樣本的觀(guān)察。

（5）流式細胞儀——可更精確及快速檢測細胞。

（6）用于檢測細胞培養條件的各種儀器，例如專(zhuān)門(mén)為快速分析細胞培養基中主要或關(guān)鍵營(yíng)養成分、代謝產(chǎn)物及氣體含量設計的多功能細胞培養分析儀、手提式CO2濃度測定儀等。