細胞培養實(shí)驗室應該怎么樣做區域規劃
組織細胞培養技術(shù)與其他一般實(shí)驗室工作的主要區別在于要求保持無(wú)菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。目前,超凈工作臺的廣泛使用,很大程度上方便了組織細胞培養工作,并使一些常規實(shí)驗室有可能用于進(jìn)行細胞培養。細胞培養實(shí)驗室應能進(jìn)行六方面的工作:無(wú)菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲藏。長(cháng)沙實(shí)驗室規劃小編和大家一起分享細胞培養實(shí)驗室應該怎么樣做區域規劃。
1、無(wú)菌操作區
(1)無(wú)菌操作室:無(wú)菌操作區只限于細胞培養及其他無(wú)菌操作的區域,最好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。理想的無(wú)菌操作室應劃為三部分:
a) 更衣室:供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩;
b) 緩沖間:位于更衣間與操作間之間,目的是為了保證操作間的無(wú)菌環(huán)境,同時(shí)可放置恒溫培養箱及某些必需的小型儀器;
c) 無(wú)菌操作間:專(zhuān)用于無(wú)菌操作、細胞培養。其大小要適當,且其頂部不宜過(guò)高(不超過(guò)2.5m)以保證紫外線(xiàn)的有效滅菌效果;墻壁光滑無(wú)死角以便清潔和消毒。工作臺安置不應靠墻壁,臺面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀(guān)察。
無(wú)菌操作間的空氣消毒:
紫外線(xiàn)燈:產(chǎn)生臭氧,并且室內溫度及濕度均較高,不利于工作人員健康。
空氣過(guò)濾的恒溫恒濕裝置需要較好的。
無(wú)臭氧紫外線(xiàn)消毒器:
電子消毒滅菌器:在高壓電場(chǎng)作用下,電子管的內外電極發(fā)生強烈電子轟擊,使空氣電離而將空氣中的氧轉換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑,能同細菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進(jìn)行氧化分解反應,從而靠臭氧氣體彌漫性擴散達到殺菌之目的,消毒時(shí)沒(méi)有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需30~40min即能自行還原成氧氣,空氣不留異味,消毒物體表面不留殘毒。
(2)凈化工作臺:操作簡(jiǎn)單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養室使用的凈化工作臺主要有兩種:
a) 側流式或稱(chēng)垂直式;
b) 外流式或稱(chēng)水平層流式。
凈化工作臺工作原理(大致相同):通常是將室內空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾,由離心風(fēng)機壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區,從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。
側流式工作臺:空氣凈化后的氣流由左或右側通過(guò)工作臺面流向對側,也有從上向下或從下向上流向對側,形成氣流屏障保持工作區無(wú)菌。工作臺結構為封閉式。
外流式(水平式)工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動(dòng),因而外方氣流不致混入操作,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗操作則對操作者不利。工作臺結構為開(kāi)放式(已少用)。
凈化工作臺應用注意:
(1)凈化工作臺應安裝在隔離好的無(wú)菌間或清潔無(wú)塵的房間內,以免塵土過(guò)多易使過(guò)濾器阻塞,降低凈化效果,縮短其使用壽命。
(2)新安裝的或長(cháng)期未使用的工作臺,工作前必須對工作臺和周?chē)h(huán)境用真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的工具進(jìn)行清潔工作,然后再采用藥物滅菌法或紫外線(xiàn)滅菌進(jìn)行滅菌處理。
(3)使用凈化工作臺前,應先用75%酒精擦洗臺面,并提前以紫外線(xiàn)滅菌燈照射30~50min處理凈化工作區內積存的微生物。關(guān)閉滅菌燈后應啟動(dòng)風(fēng)機使之運轉兩分鐘后再進(jìn)行培養操作。
(4)凈化工作區內不應存放不必要的物品,以保持潔凈氣流流型不受干擾。
(5)注意凈化區內氣流的變化,一旦感到氣流變弱,如酒精燈火焰不動(dòng),加大電機電壓仍未見(jiàn)情況改變則說(shuō)明濾器已被阻塞,應及時(shí)更換。一般情況下,高效過(guò)濾器三年更換一次。更換高過(guò)濾器應請專(zhuān)業(yè)人員操作,以保持密封良好。粗過(guò)濾器中的過(guò)濾布(無(wú)紡布)應定期清洗更換,時(shí)間應根據工作環(huán)境潔凈程度而定,通常間隔3-6個(gè)月進(jìn)行一次。
(6)凈化工作臺使用完畢應及時(shí)清理工作臺面上的物品并用酒精擦洗臺面使之始終保持潔凈。
(7)凈化工作臺應定期進(jìn)行功能測試,檢查凈化工作臺各項工作指標是否達到要求,例如進(jìn)行無(wú)菌試驗,定期檢查臺面空氣的潔凈度是否達標。
超凈工作臺的無(wú)菌程度,無(wú)菌試驗前及操作過(guò)程中需檢查空氣中菌落數;取直徑約90mm平皿,在超凈工作臺內點(diǎn)燃酒精燈,在酒精燈旁,以無(wú)菌操作,將平皿半開(kāi)注入溶化的營(yíng)養瓊脂培養基約20ml,制成平板,在30~35℃預培養48小時(shí),證明無(wú)菌后將3個(gè)平板,以無(wú)菌方式帶入超凈工作臺內左、中、右各放一個(gè);打開(kāi)平皿蓋扣置,平板在空氣中暴露30分鐘后將平皿蓋蓋好,置30~35℃培養48小時(shí),取出檢查,100級清潔度要求:3個(gè)平皿上生長(cháng)的菌落數平均不得超過(guò)1個(gè)。
超凈工作臺應定期請有關(guān)部門(mén)檢查其潔凈度,應達到100級(一般用塵埃粒子計數儀)檢測塵埃粒徑≤5祄的粒數不得超過(guò)3.5個(gè)/升;空氣流量應控制在0.75~1.0m3/s;細菌菌落數平均<1個(gè),可根據無(wú)菌狀況必要時(shí)置換過(guò)濾器。
2、孵育區
本區對無(wú)菌的要求雖不比無(wú)菌區嚴格,但仍需清潔無(wú)塵,因此也應設置在干擾少而非來(lái)往穿行的區域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行,后者費用高,一般實(shí)驗室多采用孵箱進(jìn)行工作。
3、制備區
在該區主要進(jìn)行培養液及有關(guān)培養用的液體等的制備。
4、儲藏區
主要存放各類(lèi)冰箱、干燥箱、液氮罐、無(wú)菌培養液、培養瓶等,此環(huán)境也需要清潔無(wú)塵。
5、清洗和消毒滅菌區
清潔和消毒滅菌區應與其他區域分開(kāi),主要進(jìn)行所有細胞培養器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。
以上內容是福臨建設的小編分享的細胞培養實(shí)驗室應該怎么樣做區域規劃,希望對需要的朋友有所幫助。想要了解更多實(shí)驗室規劃設計,實(shí)驗室建設,實(shí)驗室凈化裝修等知識,請關(guān)注福臨實(shí)驗室網(wǎng)站了解更多實(shí)驗室資訊。
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